小鼠载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒

小鼠载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒

ELISA法是免疫诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定，根据已经使用的结果，认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查，而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此，也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗ti，而且也可用于测定体液中的循环抗原，所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大，

免责声明

1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。

2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。

3. 产品特点

一、高效、灵敏、特异的抗ti；

二、稳定的重复性和可靠性；

三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；

四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；

五、节省实验经费。

elisa试剂盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度，损失越少，回收率越高，如果作标液1PPM，就是1毫克/升，而作出标准数据为0.99毫克/升，就是说你的回收率是99%，这个与真实成分有密切的关系，说明方法的准确度。比如水中总无机氯含量测定，样品水中含有无机氯20mg/L，取100mL被测水样品，加入0.1mL浓度为10mg/mL的含无机氯标准样品，测定时忽略体积变化，如果测定出样品中无机氯为29.8mg/L，则认为回收率为99%。

小鼠载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒

ELISA试剂盒操作注意事项：

1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法：

1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液

5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。

常用方法及原理如下：

1. 夹心法：

夹心法常用于检测大分子抗原，一般的操作步骤为:

a. 将具有专一性的抗ti固著（coating）于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗ti

b. 加入待测检体，检体中若含有待测的抗原，则其会与塑胶孔盘上的抗ti进行专一性键结

c. 洗去多余待测检体，加入另一种对抗原专一的一次抗ti，与待测抗原进行键结

d. 洗去多余未键结一次抗ti，加入带有酶的二次抗ti，与一次抗ti键结

e. 洗去多余未键结二次抗ti，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或仪器读取呈色结果

原理：针对抗原分子上2个不同抗原决定簇的单克隆抗ti分别作为固相抗ti和酶标抗ti，将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物。

2. 间接法

间接法常用于检测抗ti，一般的操作步骤为：

a. 将已知的抗原固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余的抗原。

b. 加入待测检体，检体中若含有待测的一次抗ti，则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结。

c. 洗去多余待测检体，加入带有酶的二次抗ti，与待测的一次抗ti键结。

d. 洗去多余未键结二次抗ti，加入酶底物使酶呈色，藉仪器（ELISA reader）测定塑胶盘中的吸光值（OD值），以评估有色终产物的含量即可测量待测抗ti的含量。

原理：利用酶标记的抗抗ti以检测已与固相结合的受检抗ti。

3. 竞争法

竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制，一般用于检测小分子抗原，其操作步骤为：

a. 将具有专一性的抗ti固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗ti

b. 加入待测检体，使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的抗ti进行专一性键结

c. 加入带有酶的抗原，此抗原也可与塑胶孔盘上的抗ti进行专一性键结，由于塑胶孔盘上固著的抗ti数量有限，因此当检体中抗原的量越多，则带有酶的抗原可键结的固著抗ti就越少，亦即，两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上抗ti键结，即所谓竞争法之由来。

d. 洗去检体与带有酶的抗原，加入酶底物使酶呈色，当检体中抗原量越多，代表塑胶孔盘内留下之带有酶的抗原越少，显色也就越浅。

e. 当需要侦测无法获得两种以上单一性抗ti的抗原，或是不易得到足够的纯化抗ti以固著于孔盘上时，一般会考虑使用竞争法ELISA。

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