植物黄烷酮3-羟化酶(F3H)ELISA试剂盒

检测原理

试剂盒采用双抗原一-步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA) 。往预先包被病毒性腹泻病毒抗ti的包被微孔中，依次加入标本、HRP标记的检测抗原，经过温育并彻di洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在suan的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450NM波长下测定吸光度(OD值) ，与CUTOFF值相比较，从而判定标本中猪病毒性腹泻病毒(BVDV) 的存在与否。

样品收集、处理及保存方法

1.血清:使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆: EDTA、柠檬suan盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液: 3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转 离心10分钟取上清。

5.保存:如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20°C， 避免反

复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

试剂盒性能

1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。

2. 灵敏度：最di检测浓度小于0.1 U/mL。

3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。

6. 有效期：6个月

植物黄烷酮3-羟化酶(F3H)ELISA试剂盒

样品收集、处理及保存方法

1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品

1. 酶标仪（450nm）

2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒温箱

操作注意事项

1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。